更新時(shí)間: | 2023-10-27 |
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廠商性質(zhì): | 生產(chǎn)廠家 |
提供商:上海研謹(jǐn)生物/杭州研謹(jǐn)生物服務(wù)名稱:免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)規(guī)格:實(shí)驗(yàn)服務(wù)價(jià)格:2000元周期:1-3個(gè)月
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài)的優(yōu)點(diǎn)。
免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)意義
IncRNA可與蛋白質(zhì)、DNA和RNA相互作用,實(shí)現(xiàn)多樣化功能,CHIRP可以探討IncRNA與其互作的DNA.蛋白質(zhì)的功能與作用機(jī)制,是相關(guān)科學(xué)研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳調(diào)控等生命活動中發(fā)揮重要作用,CHIRP是研究
IncRNA的重要技術(shù)手段,可在全基因組范圍內(nèi)鑒定RNA與染色質(zhì)的互作,并對其進(jìn)行定性、定量及定位的分析。
免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)原理
CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通過結(jié)合生物素的核酸探針,將目標(biāo)RNA拉下來,與之共同作用的DNA染色體片段(DNA與蛋白質(zhì)復(fù)合體)就會被吸附下來,后可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質(zhì)譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質(zhì)。
CHIRP的實(shí)驗(yàn)流程
①探針設(shè)計(jì):設(shè)計(jì)反義穿核苷酸探針:
②細(xì)胞培養(yǎng);
③破碎細(xì)胞:
④生物素標(biāo)記的DNA探針與RNA雜交;
⑤CHIRP;
⑥RNA、DNA及核酸結(jié)合蛋白提取; .
⑦分析檢測。,
結(jié)果展示
實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1.實(shí)驗(yàn)周期: 1-3個(gè)月
2.交付標(biāo)準(zhǔn): CHIRP鑒定結(jié)果報(bào)告、分析報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、 耗材、實(shí)驗(yàn)步驟)、原始數(shù)據(jù)等
實(shí)驗(yàn)需與客戶確認(rèn)的信息
1.目的基因與蛋白信息。
2.樣本類型與種屬
3.是否需要生信分析
注意的問題:
(1)細(xì)胞裂解采用溫和的裂解條件,不能破壞細(xì)胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或Triton X-100)。每種細(xì)胞的裂解條件是不一樣的,通過經(jīng)驗(yàn)確定。不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細(xì)胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。
(2)使用明確的抗體,可以將幾種抗體共同使用。
(3)使用對照抗體:
單克隆抗體:正常小鼠的IgG或另一類單抗
兔多克隆抗體:正常兔IgG
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 試劑盒免費(fèi)代檢測 | 實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 |
透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡 | 核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn) |
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做 | 酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù) | 雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒 | 喹諾酮類快速檢測試劑盒 |
組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù) | 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn) | 免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
ATP/ADP檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 蛋白相互作用分析 | 堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù) |
PKC活性檢測實(shí)驗(yàn) | 非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn) (Label-free) | DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 端粒酶活性檢測實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞生長曲線的測定 | 掃描電鏡服務(wù) | NF-KB p65活性檢測實(shí)驗(yàn) | 慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù) |