檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液,100×)說明書
CitrateBuffer(100×)
檸檬酸緩沖液(IHC抗原修復(fù)液,100×)
Cat.No.K0128
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組分說明
Cat.No. K0128
Volume 100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
福爾馬林固定時(shí),組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇,同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使抗原決定簇隱蔽。因此,對(duì)于石蠟切片,要求在進(jìn)行 IHC染色前,先進(jìn)行抗原修復(fù),即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破壞,恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。本抗原修復(fù)液適合于大多數(shù)的抗原,用該修復(fù)液修復(fù)后陽(yáng)性染色明顯增強(qiáng),抗原定位理想。
注意事項(xiàng)
1. 請(qǐng)使用足量的修復(fù)液,修復(fù)過程中保證組織切片*浸沒在修復(fù)液中。
2. 使用沸水浴或高壓修復(fù)時(shí),操作請(qǐng)務(wù)必謹(jǐn)慎,尤其高壓修復(fù)時(shí),保證鍋內(nèi)有足量的修復(fù)液,以防止干燒。
3. 推薦的修復(fù)時(shí)間為達(dá)到理想修復(fù)效果所需時(shí)間,如組織粘片不牢,容易掉片,請(qǐng)酌情減少修復(fù)時(shí)間。
使用方法
1.高壓熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將稀釋好的修復(fù)液加入高壓鍋內(nèi),將待修復(fù)切片浸于其中,保證修復(fù)液沒過組織(最好將切片浸入盛修復(fù)液的塑料容器內(nèi),再置于鍋內(nèi)修復(fù)液浴中),蓋上壓力鍋蓋,加熱至均勻噴汽,從噴汽開始計(jì)時(shí),1~2分鐘后壓力鍋離開熱源,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS(0.01MpH7.4)漂洗2次,每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度最大,是
2Z常用的熱修復(fù)法。
微波熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將切片放入盛有修復(fù)液的容器中,置微波爐內(nèi)加熱至沸騰,停止加熱,使容器內(nèi)液體溫度下降保持在95℃~98℃之間并持續(xù)10~15分鐘(注意:請(qǐng)根據(jù)具體機(jī)型酌情設(shè)置條件,務(wù)必滿足以上步驟中對(duì)溫度和時(shí)間的要求)。取出容器,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS(0.01MpH7.4)漂洗2次,每次3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復(fù)強(qiáng)度大于沸水浴,但小于高壓修復(fù)。
3. 沸水浴熱修復(fù):根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋100倍后即可使用(終濃度為0.01mol/L)。將待修復(fù)切片*浸入盛有修復(fù)液的容器中,并將此容器置于盛去離子水的大器皿水浴中,電爐上加熱煮沸,從修復(fù)液的溫度到達(dá)95℃起開始計(jì)時(shí)15~20分鐘。讓切片在修復(fù)液中自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗,再用PBS(0.01MpH7.4)漂洗2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。該方法效果較微波和高壓修復(fù)差。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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